1)定期消毒灭菌
如果空间里的微生物数量超标即微生物数量多于空气洁净区度规定允许数量,必须采取空间空气消毒灭菌的方法,对洁净区空间空气进行灭菌,杀死空气中的浮游菌,控制沉降菌的数量,降低产品受微生物污染风险,预防药品中的微生物超标。
2)完善环境监测程序
制药厂及食品厂洁净区空间环境微生物控制,需对洁净区的沉降菌和浮游菌进行动态监测或静态监测,确保洁净区的空气洁净度符合新版GMP要求,微生物的数量必须在符合GMP要求的生产环境要求。沉降菌、浮游菌等是评价洁净室(区)级别的重要指标。关于沉降菌、浮游菌的监测方法可分别参照:GB/T 16292-2010、GB/T 16294-2010、GB/T 16293-2010,具体浮游菌检测操作规程如下:
1、取样前准备工作
1.1 依据检测区域的取样点数,按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。
1.2 在超净工作台内,以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装,待培养基凝固后移出洁净区。
1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30~35℃培养48小时。取出逐个检查,确认无菌落数后即可使用。
1.4 采样:将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。
2、仪器、设备和培养基
2.1 所用的仪器、设备和培养基
2.1.2 浮游菌采样器
2.1.3 培养皿(φ90mm×15mm)
2.1.4 培养基(营养琼脂培养基)
2.1.5 恒温培养箱
2.2 仪器、设备、培养基的要求
2.2.1 浮游菌采样器
2.2.1.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。
2.2.1.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作。
2.2.1.3 采样器必须按仪器的检定周期,定期对仪器作检定,以保证测试数据的可靠性,检验项目有:定时器,转盘转速,流量计。
2.2.1.4 每次测试前应先接通电源,启动真空抽气泵,然后调节流量计和定时器。
2.2.1.5 空气采样量根据需要选定,已知采样器的流量(L/min),设定采样时间(min)两者相乘即得采样量(L)。
2.2.1.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造,采样管严禁渗漏,内壁应光滑,采样管的长度应根据测定点的高度定,尽量减少弯曲。
3、测试方法
3.1 测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒。
3.1.1 采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌。
3.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。
3.1.3 采样前,先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面,采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。
3.1.4 采样口及采样管使用前必须高温灭菌,如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒,应将管中的残留液倒掉并晾干。
3.1.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服,在转盘上放入或调换培养皿前,双手用消毒剂消毒。
3.2 采样程序
3.2.1 仪器经消毒后先不放入培养皿,开动真空泵抽气,使仪器的残余消毒剂蒸发,时间不少于5min,并调好流量、转盘转速。
3.2.2 关闭真空泵,放入培养皿,盖上盖子后调节采样品缝隙高度。
3.2.3 置采样器于采样点后,开启采样器、转动定时器,根据采样量设定采样时间。
4、测试规则
4.1 测试状态
4.1.1 浮游菌测试前微生物限度检查室已经消毒过。
4.1.2 测试状态为静态测试,并在报告中注明测试状态。
4.2 测试人员
4.2.1 测试人员必须穿戴符和被测环境级别的工作服。
4.2.2 静态测试时,室内人员不得多于2人。
4.3 测试时间
4.3.1 对单向流,测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。
4.3.2 对非单向流,测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。
4.4 最少采样点数目及其布置,最小采样量,见下表:
4.4.1 工作区测点位置离地0.8m~1.5m左右,送风口测点位置离开送风面30cm左右;可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。
4.4.2 每个采样点一般采样一次。
4.4.3 对于单向流或送风口,采样器采样管口朝向应正对气流方向;对于非单向流,采样管口向上。
4.4.4 布置采样点时,至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上。
4.4.5 采样时,测试人员应站在采样口的下风侧。